用二甲双胍可能被用于治疗银屑病?
采用1、2、5、10、20、50 mmol/L二甲双胍分别作用于HaCaT细胞24、48、72 h,CCK8法检测二甲双胍对HaCaT细胞存活率的影响。流式细胞仪检测0(对照组)、0.5、1、2、5、10 mmol/L二甲双胍对培养48 h的HaCaT细胞周期和凋亡的影响,Western印迹法检测HaCaT细胞增殖和分化相关蛋白角蛋白16、角蛋白17、角蛋白1、内披蛋白,凋亡相关蛋白Bax、Bcl-2及AKT/mTOR/STAT3通路蛋白表达水平的影响,ELISA检测HaCaT细胞炎症因子白细胞介素8(IL-8)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)、IL-23分泌水平。
在倒置显微镜下观察不同浓度二甲双胍干预48 h对HaCaT细胞形态的影响(图中标尺 = 50 μm)二甲双胍干预后,细胞形态变得不规则,细胞间粘附性变差,连接不紧密,细胞数量减少,培养液中细胞碎片增多,细胞形态改变随药物浓度增加更加明显
结果显示,二甲双胍对HaCaT细胞增殖有抑制作用,且随着二甲双胍浓度的增加,细胞存活率逐渐降低。0、0.5、1、2、5、10 mmol/L二甲双胍干预HaCaT细胞48 h后,G2/M期细胞比例逐渐增加,早期细胞凋亡率逐渐升高。
随二甲双胍浓度增加,细胞增殖分化角蛋白1、促凋亡蛋白Bax蛋白表达呈上升趋势,细胞凋亡相关角蛋白16、角蛋白17、凋亡蛋白Bcl-2蛋白表达呈下降趋势。不同浓度二甲双胍干预48 h后,HaCaT细胞IL-8、TNF-α表达水平明显下降,但IL-23表达无明显变化。
不同浓度二甲双胍干预HaCaT细胞48 h对内披蛋白、角蛋白1、角蛋白16、角蛋白17、Bax、Bcl-2蛋白表达的影响1:对照组; 2 ~ 6:分别为0.5、1、2、5、10 mmol/L二甲双胍组。随二甲双胍浓度增加,角蛋白1、Bax蛋白表达逐渐增加,角蛋白16、角蛋白17、Bcl-2蛋白表达逐渐降低,但各组内披蛋白的表达无明显差异。
0、0.5、1、2、5、10 mmol/L二甲双胍干预HaCaT细胞48 h后,随二甲双胍浓度增加,p-AKT、p-mTOR、p-STAT3表达水平逐渐下降,而AKT、mTOR、STAT3蛋白表达差异无统计学意义。
不同浓度二甲双胍干预48 h后对HaCaT细胞分泌白细胞介素8(IL-8)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)、IL-23水平的影响 a:P < 0.05;b:P > 0.05
因此,二甲双胍可能通过调控AKT/mTOR/STAT3信号通路抑制HaCaT细胞增殖,促进HaCaT细胞分化,促进细胞凋亡及抑制炎症因子分泌。
文章来源于:中华皮肤科杂志
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